Полиакриламид гель зуурах протокол

Полиакриламид

Денатурацид ордоггүй полиакриламидын гелийг давхар гинжит ДНХ-г гүйлгэхэд ашигладаг. Гэхдээ үүнийг уургийг судлахад өргөн хэрэглэдэг.

Акриламид нь аммонийн персульфат, TEMED-ийн нөлөөллөөр винил полимеризацид орж поликариламидын гинжүүдийг үүсгэдэг. Мөн бифункциональ cross-linking agents байгаа үед энэ нь цаашлаад 3 хэмжээст жигд тархсан нүх сүвтэй бүтцийг үүсгэдэг.

Жишээ протокол

Дээж болох 20 µл цусны ийлдсэн дээрээ 20 µл сахароз нэмж өгнө. Энэ нь хүндрүүлэх үйлчлэлтэй юм. Энэ хоёрын хэмжээ ямагт 1:1 байх ёстой.

30%-ийн акриламидын 50 мл сток гель бэлдэхдээ акриламид болон bis-акриламидын харьцаа 29:1 байх ёстой. Нэрмэл усан дээр акриламидаа нэмж соронзон холигчоор хутгаад дараа нь 500ºС хүртэл халааж уусгаад шүүж авна.

Үндсэн гель зуурах 

8%-ийн гель 15 мл-т бэлтгэнэ.

Ус 6,9 мл

30%-ийн акриламидаа холино (4 мл).

1,5 М Tris (pH 8.8) – 3.8 мл

10% SDS  – 0.15 мл

10% Аммонийн персульфат – 0.15 мл

TEMED – 0.009 мл

Дээд гель зуурах

Ус – 3.4 мл

30%-ийн акриламидыг холино – 0.63 мл

10 M Tris (pH 6.8) – 0.63 мл

10% SDS – 0.05 мл

10% аммонийн персульфат – 0.05 мл

TEMED – 0.005 мл

Advertisements

Хариулт үлдээх

Fill in your details below or click an icon to log in:

WordPress.com Logo

You are commenting using your WordPress.com account. Log Out / Өөрчлөх )

Twitter picture

You are commenting using your Twitter account. Log Out / Өөрчлөх )

Facebook photo

You are commenting using your Facebook account. Log Out / Өөрчлөх )

Google+ photo

You are commenting using your Google+ account. Log Out / Өөрчлөх )

Connecting to %s